血片干燥方式,那些年被你忽略过无数次的细节

作者:李 婷 丽水市人民医院

审核:陈宏伟 秦皇岛市第一医院

说起毛细胞,想必大家都非常熟悉了,主要见于HCL,HCLv,SMZL和SDRPL,我们称之为血液界的四胞胎。今天我要讲的重点是血涂片干燥方式对于细胞形态影响的差异,不知道平时工作中各位老师们是否注意过这样的小细节。但往往是被我们忽视的这些小细节决定着成败!

简要病史:患者,女性,76岁,因“白细胞增高”入院。

血常规原始结果:

散点图:

出现这样的血常规及异常散点图结果,仪器触发复检规则,自动进行推片镜检,镜下可见这样一类细胞。

图1.仪器自动推片,瑞氏染色

咦,荷包蛋样的细胞?各位看官们,您怎么看?

别急哈,其实这就是毛细胞,因为这是流水线自动推片染色的,血涂片是经过自然风强力干燥的,所以大家熟悉的毛细胞变成煎鸡蛋样了。

有文献有真相,是时候亮出证据了,请看下图图2[1]

已经有日本学者在今年5月份发表了类似的文章,在强力干燥和自然干燥下,HCL中的毛细胞形态完全不同,强力干燥---煎鸡蛋样(fried-egg),而自然干燥---我们形容为长睫毛样(long-eyelash)。

事实果真如此吗?笔者稍稍验证下立刻辨真伪!我们分别用吹风机的热风和冷风分别对推好的血涂片立刻进行强力干燥,该病人刚好有一管4度过夜的血常规,新鲜自然干燥,热风干燥,冷风干燥与4度过夜血(包括自然干燥与冷热风强力干燥),六张血涂片同时进行瑞氏染色。

接下来便是见证奇迹的时刻了!

图3.自然干燥,热风干燥,冷风干燥与4度过夜血涂片瑞氏染色

由上图可知,毛细胞在自然干燥下染色呈现经典的形态:长睫毛样(long-eyelash),而在冷热风强力干燥与4度过夜(无论自然干燥与强力干燥否)均呈现煎鸡蛋样(fried-egg)形态。

该例白细胞持续性增高,单核细胞绝对计数增多,细胞具有较显著的核仁,免疫分型表现为CD45略弱于正常淋巴细胞,强表达CD19、CD20、CD11c、FMC7、弱表达CD103,不表达CD5、CD10、CD25;BRAFV600E阴性,因此该例为HCLv。

后来跟深圳市龙华区人民医院的陈雪艳老师交流,她也碰到这样煎鸡蛋样的毛细胞,因为三系明显减低,毛细胞数量很低,差点漏检了,还好注意到了毛细胞在这种特定条件下会出现这样的形态。不知大家注意到图2没有,该文章同时提到CLL在自然干燥与强力干燥时也会出现类似的情况,因此我们猜测,在其他B-LPD中的淋巴细胞在强力干燥时也会出现类似毛细胞般的特殊形态。

平时工作中手工涂片为了快速干燥、尽快染色,我们有时候会用低档风扇轻轻吹一下刚刚涂好的血涂片,殊不知这样一个被我们忽视的小细节却对细胞形态却产生了这么大改变!不看不知道,一看吓一跳!相比之下还是自然干燥对于细胞的形态影响最小!

因此撰此小文以提醒同道们,在平时血片复检时,一定要注意到可能影响细胞形态的各种因素,包括自动推片机自然风强力干燥以及非自然干燥的其他各种干燥方式。细节决定成败!处处留心皆学问!

参考文献:

1.Tohyama K.Present status and perspective of laboratory hematology in Japan: On the standardization of blood cell morphology including myelodysplasia: On behalf of the Japanese Society for Laboratory Hematology. Int J Lab Hematol. 2018 , 40(S1):120-125.

来源:血液病综合诊断学术交流

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